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武漢貝科新肽科技有限公司
主營：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
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以菌落原位雜交為例：對分散在若干個(gè)瓊脂平板上的少數(shù)菌落（100-200）進(jìn)行篩選時(shí)，可采用該方法。將這些菌落歸并到一個(gè)瓊脂主平板以及已置于第二個(gè)瓊脂平板表面的一張纖維素濾膜上。經(jīng)培養(yǎng)一段時(shí)間后，對菌落進(jìn)行原位裂解。主平板應(yīng)貯存于4℃直至得到篩選結(jié)果。
將少數(shù)菌落轉(zhuǎn)移到纖維素濾膜上
（1） 在含有選擇性的瓊脂平板上放一張纖維素濾膜。
（2） 用無菌牙簽將各個(gè)菌落先轉(zhuǎn)移至濾膜上，再轉(zhuǎn)移至含有選擇性但未放濾膜的瓊脂主平板上。應(yīng)按一定的格子進(jìn)行劃線接種（或打點(diǎn)）。每菌落應(yīng)分別劃線于兩個(gè)平板的相同位置上。后，在濾膜和主平板上同時(shí)劃一個(gè)含有非重組質(zhì)粒的菌落。
（3） 倒置平板，于37℃培養(yǎng)至劃線的細(xì)菌菌落生長到0.5-1.0mm的寬度。
（4） 用已裝防水黑色繪圖墨水的針頭穿透濾膜直至瓊脂，在3個(gè)以上的不對稱位置作標(biāo)記。在主平板大致相同的位置上也作上標(biāo)記。
（5） 用Parafilm膜封好主平板，倒置貯放于4℃，直至獲得雜交反應(yīng)的結(jié)果。
（6） 裂解細(xì)菌，按本段下面所述方法，使釋放的DNA結(jié)合于纖維素濾膜。
植物組織原位雜交是一種重要的分子生物學(xué)技術(shù)，它可以用來研究植物基因的表達(dá)和調(diào)控。該技術(shù)利用DNA探針與目標(biāo)組織中的RNA或DNA結(jié)合，從而確定目標(biāo)基因的表達(dá)模式和位置。本文將介紹植物組織原位雜交的原理、步驟和應(yīng)用。
原理
植物組織原位雜交的原理是利用DNA探針與目標(biāo)組織中的RNA或DNA結(jié)合，動(dòng)物組織原位雜交，從而確定目標(biāo)基因的表達(dá)模式和位置。DNA探針是一段已知序列的DNA分子，可以與目標(biāo)RNA或DNA的互補(bǔ)序列結(jié)合。在組織原位雜交中，DNA探針通常標(biāo)記有熒光染料或性同位素，以便于檢測。
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第3年
