原位雜交是一種非常重要的技術(shù),因為它可以在細胞或組織的自然環(huán)境中研究基因表達和調(diào)控。它可以幫助科學(xué)家們了解基因在特定組織或細胞類型中的作用和功能,以及在疾病發(fā)生和發(fā)展過程中的變化。此外,這項技術(shù)還可以用于檢測基因變異和染色體異常,以及監(jiān)測細胞生長和凋亡。
雖然原位雜交是一項非常有用的技術(shù),但它也有一些限制。首先,探針的特異性可能受到干擾,導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。其次,探針的數(shù)量和位置可能受到細胞或組織中其他成分的影響。此外,這項技術(shù)的操作比較繁瑣,原位雜交服務(wù),需要專門的技術(shù)和設(shè)備,而且需要大量的實驗和對照才能獲得可靠的結(jié)果。
原位雜交第三天
1) 用1ml含10%熱滅清的MABT溶液置換溶液,放置搖床上25分鐘,然后用1mlMABT置換,25分鐘,再用1mlMABT溶液置換,一小時以上,后用1mlMABT溶液置換,原位雜交公司,25分鐘。
2) 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次,每次放置五分鐘。
3)將胚胎轉(zhuǎn)入十六孔板中,吸去staining buffer,加上300ul BM Purple AP Substrate(底物,用之前加5mM左旋米唑),原位雜交,十六孔板外面包上錫箔紙以避光,避免搖動,室溫下顯色。
4)每隔一小時觀察胚胎是否開始顯色
5)將顯色完全的胚胎中的底物吸出,用PBST洗兩三次后加上4%多聚甲醛固定,拍照。
6)4C冰箱保存。
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