免疫蛋白熒光定位-貝科新肽(推薦商家)

詢盤留言 |投訴|申領(lǐng)|刪除 產(chǎn)品編號(hào)：591513883 更新時(shí)間：2025-02-02

武漢貝科新肽科技有限公司

主營(yíng)業(yè)務(wù)：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
公司官網(wǎng)：bkxtbio.com.cn
公司地址：湖北省武漢市洪山區(qū)關(guān)山大道289號(hào)紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號(hào)

業(yè)務(wù)熱線： 15002786799 (夏先生先生)

產(chǎn)品詳情
聯(lián)系方式

供貨總量 : 不限
價(jià)格說明 : 議定
包裝說明 : 不限
物流說明 : 貨運(yùn)及物流
交貨說明 : 按訂單

GaMYB2 在洋蔥表皮細(xì)胞中的瞬時(shí)表達(dá)分析：采用基因轟擊的方法，用包裹質(zhì)粒的金粉對(duì)洋蔥表皮進(jìn)行轟擊，暗培養(yǎng)過夜后，在激光共聚焦顯微鏡下進(jìn)行觀察，免疫蛋白熒光定位，從圖A 中可以看出對(duì)照GFP空載體在整個(gè)洋蔥細(xì)胞均能看到綠色熒光，為組成型表達(dá)；從圖B 中發(fā)現(xiàn)GaMYB2-GFP 的融合表達(dá)載體只能在細(xì)胞核中能看到綠色熒光，這進(jìn)一步證明該蛋白不具有跨膜蛋白結(jié)構(gòu)，定位在細(xì)胞核中，具有轉(zhuǎn)錄因子的一般特征。

直接法

將標(biāo)記的特異性熒光，直接加在抗原標(biāo)本上，經(jīng)一定的溫度和時(shí)間的染色，用水洗去未參加反應(yīng)的多余熒光，室溫下干燥后封片、鏡檢。

間接法

如檢查未知抗原，先用已知未標(biāo)記的特異（）與抗原標(biāo)本進(jìn)行反應(yīng)，用水洗去未反應(yīng)的，再用標(biāo)記的抗（第二）與抗原標(biāo)本反應(yīng)，使之形成—抗原—復(fù)合物，再用水洗去未反應(yīng)的標(biāo)記，干燥、封片后鏡檢。如果檢查未知，則表明抗原標(biāo)本是已知的，待檢為，其它步驟的抗原檢查相同。

為什么有的基因定位結(jié)果與預(yù)想的不一致？

對(duì)于一個(gè)特定的定位載體，只要熒光表達(dá)較好，其定位結(jié)果是確定的，不會(huì)隨人為意愿或操作而改變。至于有時(shí)候和預(yù)想的結(jié)果不一樣，可能和蛋白本身、選擇的表達(dá)載體以及熒光蛋白融合方式等有關(guān)。

為什么有的普通定位結(jié)果出來(lái)后無(wú)法準(zhǔn)確判斷其定位位置？

細(xì)胞中的細(xì)胞器復(fù)雜且多樣，除一些常見的、特征比較明顯的細(xì)胞器外，有些細(xì)胞器在激光共聚焦下形狀比較相似，例如：線粒體、過氧化物酶體、高爾基體等細(xì)胞器，它們的熒光表達(dá)形狀可能都是點(diǎn)狀，因此不易區(qū)分。這時(shí)可以結(jié)合基因的其他功能研究來(lái)判斷其可能表達(dá)的位置。另外，蛋白表達(dá)本身也是一個(gè)復(fù)雜的過程，涉及到多個(gè)合成場(chǎng)所及轉(zhuǎn)運(yùn)過程，自身表達(dá)情況可能比較復(fù)雜，因此不易判斷具體的表達(dá)位置。

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